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▍ 多重荧光免疫组化技术
多重荧光免疫组化技术
mIHC(多重荧光免疫组化)技术,也称作酪胺信号放大 (Tyramide signal amplification,TSA)技术,基于信号分子沉淀(CARD)原理,在H2O2存在时,利用二抗上偶联的辣根过氧化物酶(HRP)将荧光基团上标记的底物酪胺(T)转化为具有短暂活性的中间状态(T*)分子。随后被活化的底物分子(T*)迅速与相接的蛋白分子的富含电子区域(酪氨酸残基)进行稳定的共价结合。由于相接的蛋白(HRP,抗体,目标抗原)都含有大量的酪氨酸结合位点,因此目标抗原处会富集大量酪胺和荧光素的偶联结构,使得荧光信号得到几何级放大。
▍ mIHC技术流程

▍ mIHC技术优势
● 检测通量高,可视化多靶标,同步揭示原位表达量及定位情况;
● 不受一抗种属限制,降低抗体选择难度
● 可大幅提高被检测信号的灵敏度,放大信号约10-1000倍
● 操作无需避光,荧光信号稳定,可保存半年之久
● 分析灵活,多靶标染色结果可自由组合进行分析,也可单独拆分信号
▍ mIHC技术应用场景

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